构建了一种用于测定人血清中甲胎蛋白AP的电化学免疫传感器。用恒电位法在膨胀的石墨EG电极表面上合成聚吡咯PPP,然后使用GA戊二醛作为交联剂固定AP标记的抗体,进行免疫传感器的制备。根过氧化物酶,RPantiAP。疫传感器在含有PA的溶液中于°C孵育1分钟,然后在传感器表面修饰普鲁士蓝作为电子介质,抗原-抗体免疫结合产生的免疫复合物减少。RP催化RP的氧化效率在最佳条件下,AP浓度在1至μgL范围内呈线性,检测极限为62pgmLN =。PPy修饰的基于EG电极的免疫传感器易于制备,灵敏度高且价格适中,应该是一次性电化学免疫传感器。
胎蛋白AP是胚胎发育初期的主要血清蛋白。人是由肝细胞产生的,其含量大大降低。清BP升高对原发性肝癌的诊断很重要[1]。前,RIA放射免疫分析法被认为是准确测量AP的方法,但是存在放射性污染。
年来,已经建立并迅速发展了使用非放射性标记的各种免疫学技术。疫传感器是一种新型的生物传感器,它将生物传感器膜和包含抗原-抗体分子的信号转导体耦合在一起,其测量原理依靠抗原或半抗原及其特异性抗体的结合来形成生物传感器。定的抗原抗体复合物[2]。化学免疫检测器由于其高特异性和高灵敏度而成为近年来研究的热点之一。是,这样的传感器经常需要使用贵金属,恒温阀芯例如铂,金或玻璃碳,恒温阀芯这些电极价格昂贵并且限制了一次性电化学免疫传感器的发展。此,基于一次性检测表面的一次性电化学免疫检测器的研究尤为重要。报道,丝网印刷电极被用于电化学免疫检测器中。些电极的主要优点是可以批量生产,使用一次,并且检测简单。
胀石墨EG作为一种新型的碳基材料具有良好的导电性和化学稳定性[6],其制备容易满足基材电极的要求[7]。吡咯PPy是一种功能聚合物,可用于制造直接电化学电极功能的基质薄膜。合物包涵体是固定抗体的传统方法[8]。是,这种方法会使抗体变性并失去活性。外,大多数抗体都包含在聚合物基质中,不能与抗原有效结合[9]。这项研究中,在EG电极上修饰了PPy膜,其活性亚氨基与交联剂戊二醛GA的醛基交联。AG的另一个醛基用于将过氧化物酶标记物与辣根结合。

AP抗体RPantiAP。后,在传感器表面修饰一层普鲁士蓝P,由于P具有良好的电化学活性,因此可以用作电子介体。标记抗体上的RP可以催化P的电化学氧化。此,根据峰值电流的变化,可以确定测试样品中的AP含量,从而制备了用于PA。
描电子显微镜JM66LA日本电子有限公司,电化学工作站I66华科普天科技有限公司AP Elisa上海灵超生物技术有限公司套件常州第二人民医院提供了两份人血清样品。据文献[1],将天然片状石墨氧化以制备EG。重7g EG,并通过压片机压成片状的EG电极。该EG电极以1×cm 2的表面积浸入1摩尔L.吡咯和2摩尔LNal的工作电极中,使用铂板和饱和甘汞电极E作为电极。电极和参比电极,并向工作电极施加8 V的电势以生成单个吡咯。体在EG电极的表面聚合。合1秒后,除去EG电极,用去离子水洗涤,在室温下干燥,得到用PPy膜改性的膜改性EG电极。

改性电极浸入2%GA溶液中以活化h以获得膨胀的石墨聚吡咯戊二醛电极EGPPyGA。1μlRPantiAP逐滴添加至电极表面,并将其在°C下温育。后,用p7 P洗涤与酶弱结合的标记抗体。究条件免疫传感器的最佳工作量。电极系统:修饰的工作电极,经RPantiAP和AP抗原修饰的EG电极,铂电极为对电极,E为参比电极。P修饰的免疫传感器是通过在ymbolm @和V之间的循环伏安扫描获得的。
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