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[恒温阀芯]双重声学乙酰胆碱酯酶电化学传感器扩增检测有机磷农药

by admin / 2019/11/16 / Published in 未分类

  有机磷(OP)农药是使用最广泛的农药之一,已广泛用于农业生产中植物病虫害的预防和控制。PO不合理地用于在工厂中引起大量残留物。种农药是有效的神经毒性剂,恒温阀芯可以不可逆地抑制人体中的乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性[1],从而抑制了催化乙酰胆碱水解的能力,从而导致乙酰胆碱在人体内的积累,从而使人的神经系统受到某些生理功能的影响,甚至在严重的情况下甚至可能导致死亡[2,3]。此,建立一种快速响应,高灵敏度,准确度和可靠性的PO检测方法非常重要。前,气相色谱法[4-6],高效液相色谱法[7-9],气相色谱质谱法[10]等。广泛用于检测OP并可以给出准确的结果,但是这些方法大多数都很昂贵。作复杂且耗时,对于现场检查不切实际。年来,电化学检测方法以其操作简便,响应速度快,灵敏度高,仪器价格便宜等优点而备受关注。前,通过电化学检测OP [11-14]的检测方法通常利用其对AChE的不可逆抑制作用,通过乙酰基乙酰胆碱(ATCl)的AChE催化水解来检测硫胆碱氧化电流。检测痕量的有机磷农药。
  机磷农药对AChE的抑制率与硫代胆碱氧化电流的减少成比例,但其氧化电位较高,其他干扰物质也将氧化为该电位,从而产生氧化电流并造成干扰。项研究建立了一种新的用于检测OP的AChE电化学传感器。先,位于金电极表面的AChE催化没有纳米金种子的底物ATCI产生的硫代胆碱,并通过硫代胆碱还原氯金酸形成种子。米金;电极放置在银改善液,纳米金中。化银以较低电势沉积,从而在镀金金中形成核-壳结构。集的银还催化Ag 的更大还原。过反向伏安法定量检测沉积的银量,以获得信号放大倍数。传感器基于纳米金的生物催化颗粒的形成和金纳米颗粒的电催化银沉积,从而允许信号的双重放大,而在没有纳米金颗粒的区域中,银没有被催化还原[15-17],产生的背景电流非常小,与其他AChE电化学传感器相比,具有背景干扰和较低的检测限[18,19]。CHI 900B电化学工作站(上海晨华仪器有限公司);三电极系统:与乙酰胆碱酯酶组装的壳聚糖修饰金电极(AChECHIT / Au)是工作电极,而Hg2Cl2饱和电极(SCE)是参比电极。电极是辅助电极。酰胆碱氯化物,乙酰胆碱酯酶(C3389型,500 U / mg)和戊二醛(25%),购自美国Sigma Aldrich;马拉硫磷(标准),壳聚糖,壳聚糖(CHIT),脱乙酰度为85%),氯金酸(HAuCl4·4H2O),AgNO3,磷酸盐缓冲液(PBS,pH = 7.4),铁氰化钾,亚铁氰化物钾等所有其他试剂均为分析纯,水溶液均在超纯水中制备。
  Symbolm @ 3 mol / L AgNO3的混合溶液用作银增强溶液(当前可用)。壳聚糖溶解在2.0 mol / L的醋酸溶液中,制备质量分数为0.5%(w / v)的壳聚糖溶液,用溶液调节pH = 5.0。
  NaOH,放在冰箱中使用。改性之前,用0.3和0.05μm的氧化铝粉对金电极进行抛光以形成镜面,然后在超纯水中对电极进行超声处理,然后乙醇和超纯水干燥5分钟,然后用N 2干燥。3μl的0.5%(w / v)壳聚糖溶液滴加到抛光金电极的表面,并在室温下干燥过夜,然后用超纯水洗涤,然后在N2下干燥。5μL的20 U / mL的乙酰胆碱酯酶溶液和1μL的戊二醛(2.5%)混合在电极表面并置于潮湿的室内1 h以形成乙酰胆碱酯酶和壳聚糖。电极(AChECHIT / Au)。验原理如图1所示。AChECHIT / Au电极浸入含有不同浓度的马拉硫磷的磷酸盐(PBS)溶液中,在室温下反应15分钟,然后用氯化钠溶液冲洗。

双重声学乙酰胆碱酯酶电化学传感器扩增检测有机磷农药_no.0

  PBS并经N 2干燥。后,将20μL纳米金溶液(HAuCl43 mmol / L ATCl,0.05%(V / V))滴加到AChECHIT / Au修饰电极中,并在室温下反应。持15分钟,用超纯水洗涤并用N 2干燥。电极放置在1.0 mol / L的NH3电极上(1)AChECHIT / Au; (2)已添加纳米金溶液的AChECHIT / Au电极,和(3)已在其上电沉积银的AuNPs / AChECHIT / Au电极。AChECHIT / Au修饰电极进行酶催化,通过电沉积形成金纳米颗粒和其他银沉积物,然后将LSV扫入0.1 mol / L的HNO3溶液中。且通过比较银洗脱电流来分析有机磷对乙酰胆碱酯酶的抑制(图3)。Symbolm @ 0.10:在0.1 mol / L的HNO3溶液中线性扫描V电沉积的银,未获得银溶解响应峰(曲线1)。组装好的酶电极中滴加20μl的纳米含金溶液(含3 mmol / L的ATCl),在电沉积银后0.27 V处出现明显的溶解反应峰。电势V下,银沉积在形成的金纳米颗粒的表面上。此,添加了具有3mmol / L ATCl的纳米金形成溶液的AChECHIT / Au电极,以获得明显的银溶解响应峰,而酶电极加入0.05%HAuCl4时,没有显示出明显的银洗脱峰。为有机磷农药,马拉硫磷可不可逆地抑制乙酰胆碱酯酶的催化活性,从而减少了电极表面上的底物水解形成的巯基胆碱的量,以及纳米颗粒。过还原产生。积在金纳米颗粒表面的银也减少了,在0.27 V处获得的银溶解响应峰显着减少了约45μA(曲线3)。以看出,对银溶解反应的峰值的检测可以非常灵敏地检测有机磷农药马拉硫磷。纳米颗粒的数量和大小直接影响到沉积的银量。纳米粒子越多,银沉积物越多,但是这些纳米粒子的大小会影响这些纳米粒子的催化活性。于纳米金的粒度具有更好的催化活性,因此为纳米金选择合适的沉积条件可以显着改善传感器响应。究了ATCl浓度对银溶解电流的影响(图6a)。着ATCl浓度的增加,银的溶解电流先升高后降低。底物浓度为3 mmol / L时,溶解电流最大。可能是由于ATCl浓度的增加,硫代胆碱的形成量的增加,通过还原形成的金纳米颗粒的量的增加以及电沉积到纳米管中的银的量的增加。纳米粒子的表面。ATCl的浓度超过3 mmol / L时,还原形成的金纳米颗粒会主要在原始金纳米颗粒的表面上生长,从而使粒径增大,但纳米颗粒总数金不增加,恒温阀芯导致在纳米金中催化电镀。粒上的银量减少。此,选择最佳的ATCl浓度为3 mmol / L。化反应时间是影响纳米金形成的另一个重要因素:随着纳米液体反应时间的延长,银的溶解先增加后减少,然后在反应时间为15分钟时达到最大值(图6b)。),其原理类似于ATCl浓度变化对纳米金形成的影响。此,选择15分钟作为最佳纳米金生成时间。方法对马拉硫磷的检测具有良好的稳定性和重现性。电极用于检测湘江水,未检测到有机磷农药。果,通过标准添加-回收法验证了传感器的准确性,对每个样品进行了五次平行测量,测量结果示于表1中,回收率为95.5%。102.2%。于生物催化在两个阶段产生纳米金和纳米金催化的银沉积物,对有机磷农药进行了高灵敏度检测。Symbolm @ 0.10 V电压下,将银电沉积在生成的金纳米颗粒的表面上,最后,通过高灵敏度反向伏安法进行定量的银电沉积检测。方法具有灵敏度高,背景检测低的特点,可以检测低浓度的有机磷农药。
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