在这项研究中，核酸适体已被用作识别元件，用于识别赭曲霉毒素A（OTA）的高选择性，和金纳米颗粒已经被用作比色探针，以建立一比色适体适用于OTA的快速检测。感器结果表明，彩色传感器具有高灵敏度和特异性的OTA，其操作简单和快速的，它可用于真正的食物样品中快速检测OTA的;用0.05和5微米和0.02微米的检测限之间的浓度OTA线性相关的测色传感器520和650nm（A520 / A650）的吸光度之比。
色传感器，用于核酸的金纳米颗粒，赭曲霉毒素A赭曲霉毒素序是一类通过各种曲霉属和青霉属，特别是赭曲霉毒素A，B，C，d和四个结构类似的化合物所产生的化合物。人类健康最密切相关，污染最严重，传播最广泛的文化是赭曲霉毒素A（OTA）[1]。污染的谷类作物主导OTA，但据报道，许多其他种类的食物也存在，如水果，葡萄酒，啤酒，咖啡，可可和巧克力，中国中药材，调味料和许多其他草药产品。物由于生物累积，OTA经常在动物来源的许多食物中被发现，包括肾脏，肝脏，肌肉，血液，牛奶和乳制品[2]。OTA通常食物含量低，但它可以在较低的水平上危害人类健康。
此，建立一种具有一定灵敏度和特异性的快速检测方法至关重要，该方法简单实用，易于推广。前，最广泛使用的OTA检测方法是高效液相色谱（HPLC）和高效液相色谱质谱[3]，但这些方法复杂的预处理，繁琐的样品提取，恒温阀芯纯化过程和长时间的检测以及仪器。本高，检测成本高，不能用于大样品的快速筛选。酸适体是DNA片段或RNA单链新开发的通过配体指数富集（SELEX）的系统发育，其可特异性地结合到小蛋白质，肽，有机材料产生的金属离子等配体，广泛用作医学诊断，环境检测和基础分析等各种技术中的识别分子。
纳米粒子具有独特的光学性质小金纳米粒子（10-100nm）的水溶胶通常呈红色并且由于外部作用而聚集，它们的吸收峰变宽并向红色移动。的颜色也从红色变为蓝紫色。据这一现象，核酸适体被用作识别元件和金纳米颗粒被用作探针colorimétrique.La比色探针适体被广泛应用于各种生物化学测试和检测目标包括一个大目标有机。
子，癌细胞，金属离子和小有机分子[4]。研究开发了一种“双链复合物”比色探针，其使金纳米颗粒与核酸适体聚集。过OTA与核酸适体的结合来融合DNA链。
于静电作用，互连的金纳米颗粒再分散在溶液中，并且溶液的颜色相应地改变，因此能够快速且灵敏地检测食品中的OTA。验片紫外可见仪器和试剂分光光度计UV-2450（岛津制作所公司，日本），XS105DU电子天平（Mettler Toledo的，瑞士），纯净水机的Milli-Q（Millipore公司，USA）。金金酸（HAuCl4）分析和购买Sigma，美国，赭曲霉毒素A从卢氏，USA，甲醇（HPLC级，Merck，德国）购得，试剂的其余部分是质量分析和实验水是超纯的。
（> 18 MQ）。含核酸适体（连接链）和两个部分互补的DNA寡核苷酸（在3“和5”，分别巯基修饰）的DNA寡核苷酸通过生物工程生物工程（上海） 。有限公司合成后，序列如下：连接子（粗体斜体部分是OTA适体部分）：5′-ACTCATCTGTGAAGA？ GATCGGGTGTGGGTGGCG TAAAGGGAGCATCGGACA -3 ‘5’-末端硫醇BCA硫醇化DNA’ 3 ‘末端：5′-TCACAGATGAGTA10-SH-3’;使用前三个DNA串将前三个DNA溶解在水中以制备100μM溶液。
纳米颗粒的制备通过柠檬酸钠还原合成用于实验的金纳米颗粒。体方法是如下：将100ml的氯金酸溶液1新鲜制备的毫加入到锥形烧瓶中，加热并煮沸上在恒定温度下的电磁搅拌2分钟，然后在5％2毫升柠檬酸钠溶液是快速加入，继续搅拌并保持加热。10分钟煮沸后，溶液的颜色由浅黄色变为酒红，停止加热并将该混合物搅拌冷却至室温，然后将制备的纳米金溶液放置在棕色试剂瓶，储存在4°C的冰箱中备用。
米粒子探针制备适体金核酸100uL的每个硫醇化DNA的到5“末端和巯基化的DNA在3”加入到10毫升的纳米金溶液端，充分搅拌并在室温下放置12小时以形成DNA链。合的Au-S键合至的纳米 – 金的表面和100微升含有核酸适体被ajoutés.Après混合连接链的溶液，将溶液在94℃下加热2分钟，迅速冷却至30℃并储存30分钟以适应核酸。体接头与结合到纳米金表面的DNA杂交。
后，在16 000转/分钟离心15分钟以除去DNA链过量非纳米金，用清水冲洗，再次离心，制备核酸适体制备金纳米颗粒的探针用10mL磷酸浓度为20mM，pH = 8.5。
盐缓冲溶液（PBS）分散并储存在4℃的冰箱中备用。OTA检测由比色计适体 – 金探针核酸标准溶液OTA纳米颗粒：OTA溶解在甲醇中，制备1 mM的标准储备液和稀释至浓度使用前用PBS测试不同的溶液。际样品中的OTA提取：在小心地喷洒不含OTA的玉米样品后，加入不同浓度的OTA样品并充分混合。取5克富集样品，加20毫升含水的80％的甲醇提取，混合，搅拌和搅拌30分钟，离心分离，然后干燥用氮气上清，加入200升甲醇为了溶解它，然后加入PBS缓冲液稀释1mL，在0.45微米微孔过滤器上过滤，并用作测试溶液。定OTA：500微升探针适体的金纳米颗粒的核酸加入到该试管中，测试溶液的500微升溶液中加入，混合有搅拌器和反应静置15分钟，然后用肉眼观察颜色变化以达到OTA。速定性检测，清扫用紫外可见分光光度计在反应液中，使用吸光度的变化在加入OTA的后，以获得OTA的快速定量检测。果与讨论检测原理的模式本研究中制备的比色探针的“双链复合物”的基本原理示于图1中。NA链配对双硫醇化末端和与适体部分互补OTA核酸纳米颗粒是官能化的。
OTA核酸适体链充当接头并与两条互补链杂交以聚集官能化的金纳米颗粒。OTA被加入到溶液中，在DNA的核酸构象的适体OTA的结合被修饰，恒温阀芯这导致在所述适体链的熔化与互补链通过静电相互作用将附聚的金纳米颗粒再分散在溶液中，并且颜色从蓝紫色变为红色。此原理的基础上，可以构建比色法以在食品中快速且灵敏地检测赭曲霉毒素A.探头适体的金纳米颗粒之前核酸OTA的和之后的显微形态，其特征在于投影电子显微镜（TEM）。是由图1显而易见的是，金纳米颗粒的地层中的通过双链DNA形成形成探针溶液。附聚物中加入OTA后，OTA中双链DNA的浓度增加，溶液逐渐变成鲜红色。入较高浓度（10微米）的赭曲霉毒素B的（OTB）到探针溶液后，将溶液的颜色保持蓝色，指示适配体探针纳米粒子的核酸具有对OTA具有良好的特异性。OTA核酸适体 – 纳米颗粒探针溶液的定量检测破坏了OTA响应过程的颜色结构，并且附聚的金纳米颗粒在溶液中返回分散状态在静电作用下。
OTA的视觉比色检测使用适体 – 纳米颗粒核酸探针溶液的颜色变化来快速检测样品中的OTA毒素。图2所示，在探针核酸适体的金纳米颗粒的溶液的溶液中，金纳米颗粒附聚使蓝色溶液中，加入OTA的0.5微米的后，将溶液变得紫嫣用分光光度计测量。纳米粒子的聚集使适体 – 纳米粒子核酸探针溶液在650nm附近具有宽的吸收峰.OTA与核酸适体的缔合，金纳米颗粒再分散于溶液中，并将吸收光谱的特征吸收峰出现在520nm，而在650nm（A650）的吸光度连续地减小，而吸光度520 nm（A520）持续增加。种波长A520 / A650和OTA的吸光度比率浓度在0.05至5μM的范围内线性相关，线性相关系数为0.996。于空白溶液的标准偏差的3倍，OTA的检测限为0.02μM。含浓度为5，10和50μg/ kg的玉米粉富集，回收率在75％至102％之间，相对标准偏差在3.8％至9.6％之间。论在核酸适体作为生物鉴定和金纳米颗粒组分作为比色探针，适体到比色传感器适合于检测OTA的基础已经实验方法简单，灵敏，具体。据所述溶液的颜色变化，OTA样品中可以灵敏地通过视觉观察检测，并且可以通过分光光度计，准确而定量检测，以改变吸收光谱的溶液。品分析表明该方法可以在食品中快速使用。选试验。考文献：[1]秀林暑湿青山，欧阳有生，生产和赭曲霉毒素[J]。国卫生检验杂志，2008年的鉴定，10：2183年至2185年。[2]李凤琴，季蓉，米曲霉。[中国人兽共患病学报[3]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理局。赭曲霉毒素的食物含量的测定国国家标准，2016 [4]宋S，王莉，李江，J赵和范C.生物传感器基于核酸适体[J]。析化学的发展趋势。2008，27：108-117。
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