建立了一种基于光纤检测技术的方法，该技术与微序列注射阀荧光猝灭相关，以确定肠灌注液中的H2S含量。本研究中，进行了单因素研究，以确定100μL0.1mol / L NaOH的溶液。光素汞的浓度为5.0×10 5 mM / L.体积50μL，进样量50μL，流式细胞检测。速为25μL/ s，样品中的H 2 S浓度通过根据H 2 S猝灭荧光素汞在521nm处的荧光来确定。方法检测H2S浓度范围为5.0×10 6符号@ 6~8.0×10符号@@ 5 mol / L，检出限为5.4×10符号@@ 7 mol确定肠灌洗液中的H 2 S含量为3.8×10 5 mM / L，RSD = 3.1％（n = 3）。方法可以有效地确定在线样品的H2S含量，为实时在线测定生物样品的H2S含量提供依据。化氢微序列注射与光纤检测 – 实验室阀门荧光荧光荧光淬灭介绍硫化氢（H2S）是一种闻起来像臭鸡蛋的有毒气体。是空气和水的污染物之一。近的研究表明，H2S是NO和CO后的一种新型信号分子。广泛用于动物体内作为一种活跃的神经调节剂，参与动物的许多生理和病理活动并对其进行调节[1]。前，H2S测量方法主要局限于传统方法，如亚甲蓝[2]，硝酸银比色法[3]，气相色谱法[4] ]等这些传统方法的检测限和灵敏度不足以测定生物样品中的极少量或痕量的H 2 S.荧光法的灵敏度较高，H2S的顺序为10 Symbolm @ 6 mol / L.荧光素汞具有强荧光。H2S中，S2 Symbolm @@与荧光素汞结合以中和荧光素汞，并且H2S含量与荧光素的荧光强度具有良好的相关性。MicroSIA Lab-on-Valve（μSIA-LOV）是第三代流动注射分析技术[5]。μSIA-LOV测定系统中，所有单元操作，例如样品稀释，试剂，样品添加，混合以及各种技术组合的组合，使得能够执行整体操作。验确定过程以受控和有效的方式进行。系统减少了微升级别的试剂和样品消耗，减少了试剂的使用，使其适用于试剂价格昂贵且样品来源的长期监测和分析有限。LOV系统不仅可以与光纤检测相关联，还可以与电化学[6]，色谱[7]，化学发光[8]，固相萃取[9]等方法相关联。原子荧光[10]。这项研究中，光纤检测技术与微序列进样阀实验室（μSIA-LOV）相结合，光纤被用作传导介质：光纤光谱仪，微序列注入分析仪，八通阀和氙灯源连接和计算机控制使用系统的自动介观流量控制功能和检测的实时监控通过光纤，可以进行样品的在线监测。这项研究中，硫化钠被用作施主以建立用于检测在肠道灌洗液H2S的光纤传感微喷射序列实验室阀的方法更详细地研究了动物体内H2S或H2S供体药物的肠道吸收特性。分析奠定基础。
验部分Microsequence实验装置注射仪（FIAlab Instruments，USA），光纤光谱仪（QE65000-FL，CCD），连续氙灯源（HPX-2000）， 200μm×1 m的光纤是海洋光学的产物。PH-10 PB-10（德国Sartorius）：实验电路中使用的连接管是PTFE管（内径0.75 mm）。用配备有FIAlab for Windows软件和SpectraSuite软件的Windows XP台式计算机监控微序列注射分析仪和光纤光谱仪。纤检测 – 微序列注入 – 实验室阀门仪表：包括一个1000μL高精度注射泵，一个带有控制通道的8通道棕色过滤多位置阀模块（LOV）综合发电厂，多个工作通道和多功能流通池等操作单元;软件调节一端的控制中心通道和通讯位置的八位阀，使中心通道和工作通道精确连接，另一端连接到注射泵分析系统。
根光纤连接到光谱仪，另一根光纤连接到氙灯源，两根光纤探针插入LOV流通池接口，光路在测量模式下垂直形成。光。经为荧光素汞（优质，美国化学服务公司）制备了试剂和溶液; Na2S.9H2O（分析纯，天津市辰辰化学试剂厂），其余试剂为分析纯。验用水是双蒸水。确称取0.0159克荧光素汞的并在1.874×10 Symbolm @@ 4摩尔/ L的浓度在100毫升含0.1摩尔/ L的NaOH棕色容量瓶中稀释，保持温度室温并稀释至所需浓度。
确称量0.240克的Na2S·9H2O，溶于水，并稀释至100毫升，浓度为0.01摩尔/ L，则其在4℃下在使用前储存，稀释浓度希望用水。Kreb-Ringer营养液（KR）：精确称取7.8g NaCl，0.35g KCl，0.37g CaCl 2，1.37g NaHCO 3，0.32g NaH 2 PO 4，0，在水中加入02克MgCl2和葡萄糖，4℃保存。灌注液系列H 2 S浓度的制备：在0.01与营养液KR mol / L的10倍（1.0毫摩尔/ L）稀释一Na 2 S溶液，再取稀释剂0，0.05，0， 1，0.15，0.2和0.25mL，5mL。容量瓶中，加入营养液KR。检测溶液：用KR营养液（5.0×10 5 mM符号/ 5mol / L）制备的Na 2 S溶液。健康大鼠麻醉后，将营养液KR从活空肠灌注（蠕动泵流量0.2毫升/分钟）最小30取在5毫升管EP试验溶液密封在4°C并进行测试。作流程实验电路如图1所示。注射泵的操作下，适量的载液（0.1 mol / L NaOH）首先受到6号端口的启发。位阀和端口n°7的速度为50μl/ s。过中央通道吸入50μL荧光素汞溶液，以50μL/ s吸入适量5端口样品溶液，并通过端口6以50μL/ s吸入100μL传输溶液。过注射泵推动时，载体液体吸进储液线圈推动试剂和样品快速混合，以形成混合区并反应完全，然后在混合扭转混合区的流率25μL/ s。光纤的流动池抽空，并通过光纤光谱仪读取反应后溶液的荧光强度。每次测量结束时，用水以300μL/ s的流速冲洗整个流动路径。有实验操作均通过FIAlab上述程序被分成6个阶段的软件自动进行的，如表1所示。果与讨论荧光汞荧光光谱吸入200μL的荧光素汞（1结果表明，荧光素汞的最大发射波长为521nm。择和荧光素荧光素汞浓度（1.0×10 Symbolm @@ 4摩尔/ L的浓度的汞量，1.0×10 Symbolem @@ 5摩尔/ L，5.0×10 @@ Symbolem 5摩尔/ L，1.0×10 Symbolm的@ 6摩尔/ L）的影响，因为LOV是一个封闭的管道系统，该管的直径小，荧光素汞浓度过大，它粘附在管道上，清洗剂长时间使用，影响测量的有效性;如果荧光素汞的浓度太低，则测量的灵敏度将受到影响，因此本实验中荧光素汞的浓度为5.0×10 5 mol / ml。液的重要性越高，混合程度越低。了确保充分混合和完全反应，荧光素 – 汞溶液的体积选择为50μL。载在载体中的NaOH溶液的浓度和体积根据文献[11]，在碱性条件下荧光素 – 汞荧光增加并且实验的灵敏度增加。NaOH（0.01，0.05，0.1，0.2和0.5mol / L）。作为载液对荧光素汞（1.0×10 5 mM / L符号）和1.0×10 5 mM符号的荧光强度的影响@ / L Na2S（图3），考虑到该实验，该实验保留了0.1％。用Mol / L NaOH作为载液。NaOH溶液为整个系统创造了碱性环境。
洗管道并进行反应后，溶液通过流动池。该实验中，使用100μL的0.1mol / L NaOH作为载液以实现上述目的。NaOH溶液中荧光素mol / L循环细胞的检出率与1.0×10 5 Symbolm @ 5 mol / L Na 2 S反应，循环池中的流速为10，15 ，20，25，30，35和40μL/ s。时信号的强度。果表明，流速太慢，会增加对待测样品的稀释效果：流速太快，信号稳定，重现性降低。25μL/ s的速率下，检测信号最强且最稳定（图4）。定所述干扰物质根据文献[12]，含有硫醇的氨基酸可以是内源性H2S供体，因此，最佳实验条件下，干扰的确定用实现检查了最大允许误差5％和L-半胱氨酸。2显示了由氨基酸，alliine，同型半胱氨酸，胱氨酸，蛋氨酸和大蒜素测定H2S引起的干扰。光素汞浓度的性能分析为5.0×10符号@ 5 mol / L，使用0.1 mol / L的NaOH溶液作为液体载体，检测率为25μL/ s，检测波长为521nm，样品的注射体积为50μL。
定硫化氢的肠灌注液浓度，得到521nm的荧光强度，强度和荧光浓度在5.0×10 6范围内线性回归。
号@@ 6~ 8.0×10符号@@ 5mol / L.等式为y = Symbolm @@ 262.13x 26182（图5），相关系数r = 0.997。论在本实验中，将微序列进样阀实验室系统（μSIA-LOV）与光纤传感技术相结合，建立了一种测定生物样品中H2S的方法。光猝灭。为信号分子，H 2 S是涉及在动物和réglemente.A目前各种生理和病理活性的内源性物质，确定H2S的最方法取样并分析，以及制备分几个阶段的样品是必要的。
本实验中，样品在LOV模块上以荧光测量模式进行测量，简化了操作步骤。
个操作都采用程序控制，提高了实验的重复性和标准化，整个系统微观改进的注入量大大减少。剂和样品的消耗大大提高了分析速度。过程与光纤传感相关联，用于在线监测活体中的H2S。
考文献Kimura H. Amino Acids，2011，41（1）：113-121赵静，方丽萍，徐革阳，唐朝树。
斌北京大学学报：医学科学，2008，39（5）：449-452赵静，方丽萍，徐戈阳，唐朝书，裴斌。京大学学报（医学版），2008，39（5）：449-452夏伟文，恒温阀芯段妮。国卫生监督杂志，2010，20（10）：2618-2618夏伟文，段妮。国卫生监督，2010，20（10）：2618年至2618年Zheivot VI Krivoruchko（V），梅德韦杰夫，Voroshina 0V。析化学。2006，61（4）：334-337 Wang JH，Hansen E.H.Staynds in Analytical Chemistry，2003，22（4）：225-231。Y，王L，T田要G，胡X，C羊，许Q. Talanta，2012，99（15）：840-845ĴVichapong，Burakham R，S Srijaranai，Grudpan K.杂志科学王阳，范世华。离，2011，34（13）：1574-1581光谱和频谱分析，2005，25（2）：184-187汪洋范师化，光谱和频谱分析，2005，25（2）：184-187维迪加尔SSMP，托特IV OSA兰格S.分析方法，2013 5（3）：585-597 R.罗德里格斯，J. L. Avivar费雷尔，LO LO塞尔达V. Talanta，2012，96：96-101，G亨特，J阿尔德F.分析。ACTA 1999，387（2）：207-215立升，玫瑰P. PKK年度回顾药理学与毒理学，2011 51：169-187Fluorescéine汞与光学检测注射微序列注射实验室上组合阀H2S在输液中intestinalesHOU军锋，关明1，李昕霞* 2（监测实验室和控制污染的决心，化学与化学工程学院，新疆师范大学，乌鲁木齐830054 ，中国）（药学院，新疆医科大学，乌鲁木齐830000，中国）摘要是由一个光纤传感技术的装置，用于在肠道灌洗液中的H 2 S的确定建立灭火荧光的方法相关联的在阀门上进行连续实验室显微注射（μSIA-lov）使用0.1 mol / L NaOH作为载体，使用50μL5.0×10。光素汞符号@@ 5 mol / L和50μ样品，流动池的检测流速为25μL/ s。H2S的根据的521纳米至H2S荧光的消光，在样品中的H 2 S浓度检测海滩浓度为5.0×10 6〜8.0×10 Symbolm @ @@ Symbolm 5摩尔/ L，检出限为5.4×10符号@ -7摩尔/升的H 2 S检测在肠内输注结果为3.8×10 Symbolm @@ 5摩尔/ L的RSD 3 ，1％（n = 3）。方法可有效测定样品中的H2S，为生物样品中H2S的实时在线测量奠定基础。键词：敏感纤维;硫化氢;顺序注射微注射;荧光素汞;荧光灭绝这项工作由国家自然科学基金资助（No.8126048）
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